baculovirus protokoll

Baculoviruses är stavformade virus hittas ofta hos insekter, särskilt i storleksordningen Lepidoptera, vilket inkluderar fjärilar, enligt George Rohrmann, Ph. D. i baculovirus molekylärbiologi. Studiet av baculovirus "uttrycket i insekter används för att undersöka nya mänskliga vacciner mot cancer och andra allvarliga sjukdomar, samt produktion av bio-insektsmedel. Sådana experiment med baculovirus involvera laboratorieprotokoll eller standardmetoder, såsom underhåll och kultur insektsceller, generering av rekombinant Baculoviruses av Direct Kloning och Beredning av baculovirus Stocks.

Underhåll och kultur insektsceller

Detta grundläggande protokollet används för att växa och bibehålla insektsceller kulturer, nödvändigt att utveckla många experiment med baculovirus. Enligt nuvarande protokollen kräver denna metod ett medium innehållande fetalt bovinserum, metaller och mjölkalbumin hydrolysat, även känd som TNM-FH, celler ur äggstockarna hos fjärilen falla armyworm (Spodoptera frugiperda), 70 procent etanol, 0,4 procent trypanblått fläcken färgämne ; serumfritt insekt cellodlingsmedium, grundläggande laboratorieglas och utrustning, t. ex. en centrifug med horisontella rotor och flytande kväve frys. Cellräkning utförs med hjälp av en apparat som kallas hemacytometer.

Generering av rekombinant Baculoviruses av Direct Kloning

Detta protokoll används för att utföra transgena experiment, när DNA eller genetiska material i en cell ändras eller "modifierat". Denna metod fta bereder används i produktionen av bio-insektsmedel. Enligt nuvarande protokoll, innebär att generera Rekombinant Baculoviruses genom Direct Kloning en vektor som innehåller genen av intresse, vilket ofta är en plasmid-en nonchromosomal molekyl av DNA kunna själv-duplicate, ett fragment av proteinet DNA-polymeras och T4 DNA ligas, som hjälper i en dubblering av DNA-molekylen, en reaktion buffert, att hålla pH eller surhetsgrad konstant, fenol-kloroform-Isoamyl alkohol, vatten vid 59 grader Fahrenheit, liksom andra reagens och laboratorieutrustning för elektrofores.

Beredning av baculovirus Lager

Detta protokoll används för produktion och lagring av baculovirus, för posterior användning i biotekniska experiment. Beredningen av viruslagren kräver en kultur av armyworm celler på en TNM-FH medium, som tidigare beskrivits, inoculant av baculovirus samt laboratorieutrustning, som spinner kultur kolvar och en skakande inkubator inställd på 80,6 grader Fahrenheit och 90 till 150 varv per minut.


Kommentarer

  • Om oss
  • Reklam
  • Få nyhetsbrev
  • Kontakta redaktören
  • RSS-feed

Redaktör: Katarina Hovenas
Nyheter redaktör: Susanne torshall

Kundservice: Maria Johansson,
Pia Hall

Tel: +46 98 00 00 01
Fax: +46 98 00 00 02

© Copyright 2014 Halsatips.com - All rights reserved.